Najpierw spójrzmy na znaczenie HPLC i LCMS, zanim przeanalizujemy różnicę między HPLC i LCMS. Chromatografia jest techniką rozdziału w analizie chemicznej, w której składniki próbki są oddzielane podczas przejścia przez ośrodek chromatograficzny. Obejmuje także interakcję z próbką, fazą stacjonarną i fazą ruchomą. HPLC oznacza Wysokosprawna chromatografia cieczowa, i jest stosowany jako metoda chromatografii cieczowej w chemii analitycznej. Połączenie Chromatografia cieczowa i spektroskopia masowa (LCMS) został opracowany do analizy ilościowej wybranych biomolekuł i tak jest wysoce czuła, dokładna i specyficzna procedura testu w porównaniu do HPLC. To jest kluczowa różnica między HPLC i LCMC. W tym artykule zapoznasz się z HPLC i LCMC, które dotyczą analizy chemicznej i omówisz różnice między HPLC i LCMS.
Popularna jest wysokosprawna chromatografia cieczowa (HPLC) technika separacji w chemii analitycznej. Jest głównie służy do oddzielania składników, do identyfikacji i oceny ilościowej każdego składnika w mieszaninie. Wcześniej ta metoda była znana jako wysokociśnieniowa chromatografia cieczowa ponieważ zależało to od pomp do przepuszczania ciekłego rozpuszczalnika pod ciśnieniem zawierającego mieszaninę próbek przez kolumnę wypełnioną stałym materiałem adsorbującym. Każdy składnik w mieszaninie próbek oddziałuje w różny sposób ze stałym materiałem adsorbującym, co powoduje różne prędkości przepływu dla różnych składników. Może to prowadzić do rozdzielenia składników wypływających z kolumny HPLC.
HPLC zastosowano do różnych Aplikacje Jak na przykład analiza poziomów witaminy D we krwi, nielegalne używanie narkotyków przez sportowców wykrywając pozostałości leku w moczu, sortowanie składników złożonej próbki biologicznej do celów badawczych i analizy oraz produkcja farmaceutyków.
Chromatografia cieczowa-spektrometria masowa (LCMS) to technika analityczna, która łączy możliwości fizycznego rozdzielania chromatografii cieczowej z możliwościami analizy masowej spektrometrii masowej (MS). Chromatografia cieczowa jest techniką rozdziału, a do analizy stosunku masy do ładunku naładowanych cząstek stosuje się spektrometrię mas. Fizyczny rozdział zwykle osiąga się za pomocą HPLC i alternatywnie, LCMS znany również jako HPLC-MS. LCMS to dominująca technika analityczna to ma bardzo wysoka dokładność, czułość i swoistość w porównaniu do HPLC. Jest więc przydatny w wielu zastosowaniach, takich jak badania, analiza leków, analiza żywności itp. LCMS jest głównie służy do oddzielania, wykrywania, identyfikacji i oceny ilościowej właściwości biochemicznych konkretnej próbki w obecności złożonych mieszanin chemicznych.
HPLC: HPLC oznacza wysokosprawną chromatografię cieczową. Jest to technika rozdzielania stosowana głównie do oddzielania składników, do identyfikacji i ilościowego oznaczania każdego składnika w mieszaninie.
LCMS: LCMS oznaczaChromatografia cieczowa i spektrometria mas. Jest to technika analityczna, która łączy możliwości fizycznego rozdzielania chromatografii cieczowej z możliwościami analizy spektrometrii mas (MS).
HPLC: Jest to tylko metoda chromatografii cieczowej.
LCMS: Jest to połączenie metody chromatografii cieczowej i metody spektrometrii mas.
HPLC: W porównaniu z LCMS analiza HPLC jest mniej wydajna i wolniejsza.
LCMS: W porównaniu z HPLC analiza LCMS jest wydajna i szybsza.
HPLC: W porównaniu z LCMS analiza HPLC jest mniej czuła.
LCMS: W porównaniu z HPLC analiza LCMS jest bardziej czuła.
HPLC: W porównaniu z LCMS analiza HPLC jest mniej specyficzna.
LCMS: W porównaniu z HPLC analiza LCMS jest bardziej szczegółowa.
HPLC: HPLC daje mniej dokładne wyniki niż LCMS do oznaczania niektórych chemikaliów.
LCMS: LCMS daje dokładniejsze wyniki niż HPLC do oznaczania niektórych chemikaliów.
HPLC: HPLC można uznać za składnik LCMS.
LCMS: LCMS nie może być uważany za składnik HPLC.
HPLC: Źródło jonów nie istnieje w urządzeniu HPLC.
LCMS: Źródło jonów jest obecne w instrumencie LCMS.
HPLC: Jony, polimery, cząsteczki organiczne i biocząsteczki można analizować za pomocą HPLC.
LCMS: Molekuły organiczne i biomolekuły można analizować. W przeciwieństwie do HPLC, LCMS może być stosowany do badania niecałkowicie rozdzielonych mieszanin.
HPLC: Schemat przyrządu HPLC jest podany na rycinie 1 i zwykle obejmuje autosampler, pompy i detektor. Próbnik wprowadza mieszaninę próbek do fazy ruchomej (mieszanina rozpuszczalników pod ciśnieniem, takich jak woda, acetonitryl i / lub metanol), która przenosi ją do kolumny. Pompy zapewniają pożądany przepływ i skład fazy ruchomej przez kolumnę. Kolumna jest wypełniona adsorbentem, który jest ziarnistą stałą cząstką, taką jak krzemionka lub polimery. Detektor wytwarza sygnał proporcjonalny do ilości obecności próbki w kolumnie, co pozwala na kwantyfikowalną analizę wybranych składników próbki. Instrument HPLC jest kontrolowany, a analiza danych jest zapewniana przez cyfrowy mikroprocesor i oprogramowanie użytkownika.
Rycina 1: Schemat urządzenia HPLC
LCMS: Schemat przyrządu LCMS podano na rycinie 2. Wyciąg próbki wprowadza się do kolumny zawierającej HPLC. Ta kolumna zachowuje metabolity próbki na podstawie cech fizycznych, a różne metabolity przepływają do spektrometru mas w różnych odstępach czasu. Spektroskopia masowa jest używana do oceny mas cząstek, do ustalenia pierwiastkowego układu cząsteczki i do wyjaśnienia struktur cząsteczek. Próbkę należy jednak zjonizować w celu wytworzenia naładowanych cząsteczek w celu określenia ich stosunku masy do ładunku. Dlatego zamiast instrumentów HPLC LCMS składa się z trzech dodatkowych modułów, takich jak źródło żelaza, analizator masy i detektor. Źródło jonów może przekształcić próbkę fazy gazowej w jony, a analizator masy grupuje jony według ich masy za pomocą pól elektromagnetycznych. Na koniec detektor określa ilościowo wartości i dostarcza dane każdego jonu obecnego w próbce. Technikę LCMS można stosować zarówno do zastosowań jakościowych, jak i ilościowych.
Rysunek 2: Schemat przyrządu LCMS
Podsumowując, HPLC jest metodą chromatografii cieczowej, podczas gdy LCMS jest połączeniem chromatografii cieczowej i spektrometrii masowej. Obie te techniki analizy mają różne cechy, ale można je wykorzystać do identyfikacji i oceny ilościowej kompozycji żywności, farmaceutyków i innych bioaktywnych cząsteczek.
Literatura Arpino, P. (1992). Połączona spektrometria masowa z chromatografią cieczową. Część III. Zastosowania sprayu termicznego. Recenzje spektrometrii mas, 11: 3. Gerber, F., Krummen, M., Potgeter, H., Roth, A., Siffrin, C. and Spoendlin, C. (2004). Praktyczne aspekty szybkiej wysokosprawnej chromatografii cieczowej z odwróconymi fazami z zastosowaniem kolumn wypełnionych cząstkami 3 μm i kolumn monolitycznych w opracowywaniu i produkcji farmaceutycznej przy zachowaniu dobrej praktyki wytwarzania. Journal of Chromatography, 1036 (2): 127–133. Lee, M. S. i Kerns, E. H. (1999). Aplikacje LC / MS w opracowywaniu leków. Recenzje spektrometrii mas, 18 (3-4): 187-279. Murray, K. K. (1997). Sprzężenie desorpcji / jonizacji laserowej wspomaganej matrycą z rozdziałami cieczy. Recenzje spektrometrii mas 16 (5): 283. Zdjęcie dzięki uprzejmości: „Hplc” autorstwa oryginalnego przesyłającego to Kjaergaard z en.wikipedia - przeniesiony z en.wikipedia. (Domena publiczna) przez Commons