Różnica między HPLC i UPLC

The kluczowa różnica między HPLC i UPLC jest to, że HPLC pozwala na analizę cząstek o wielkości około 5 mikrometrów, podczas gdy UPLC pozwala na znacznie mniejsze cząstki o wielkości około 2 mikrometrów.

Zarówno HPLC, jak i UPLC są technikami chromatografii cieczowej, które są przydatne w rozdzielaniu składników związku. Aby poznać różnicę między HPLC a UPLC, najpierw musimy wiedzieć, czym jest HPLC. Wynika to z faktu, że UPLC jest specjalną wersją HPLC i możemy ją łatwo zrozumieć, jeśli wiemy, czym jest HPLC.

ZAWARTOŚĆ

1. Przegląd i kluczowa różnica
2. Co to jest HPLC
3. Co to jest UPLC
4. Porównanie obok siebie - HPLC vs UPLC w formie tabelarycznej
5. Podsumowanie

Co to jest HPLC?

Termin HPLC oznacza High Performance Chromatografia cieczowa. Jest to technika, którą możemy zastosować do oddzielenia różnych składników związku. Jest to również najczęściej stosowana technika identyfikacji, oceny ilościowej i rozdzielania składników mieszaniny. Poza tym technika ta wykorzystuje wysokie ciśnienie do przepychania rozpuszczalników przez kolumnę. Ponadto, główne zastosowania HPLC są w biochemii do analizy składników związku. Jest to idealny sposób na separację i identyfikację aminokwasów, kwasów nukleinowych, białek, węglowodorów, pestycydów, węglowodanów, antybiotyków, sterydów i niezliczonych innych substancji nieorganicznych.

Ryc. 01: System HPLC w laboratorium

W skrócie, sposób działania techniki HPLC jest następujący. Po pierwsze, powinniśmy wprowadzić próbkę do strumienia fazy ruchomej w dyskretnych małych ilościach za pomocą pompy. Ciśnienie pompy powinno być utrzymywane na poziomie 40 MPa. Następnie ten strumień fazy ruchomej przenika przez kolumnę HPLC. Ponadto składniki w próbce przechodzą przez kolumnę. Jednak ich prędkości ruchu różnią się od siebie. Różnica ta wynika z różnicy w interakcjach między składnikami próbki a adsorbentem wewnątrz kolumny. Ten adsorbent nazywamy fazą stacjonarną, ponieważ znajduje się on wewnątrz kolumny (nie porusza się). Po drugie, na końcu kolumny możemy pobrać próbkę, która wymywa się z kolumny. Tam możemy określić różnice w czasach retencji dla każdego składnika w próbce.

Co to jest UPLC?

Termin UPLC oznacza Ultra-wydajna chromatografia cieczowa. Jest to odmiana HPLC, ale metoda działania jest taka sama. Jednak w przeciwieństwie do HPLC ta metoda pozwala na analizę bardzo małych cząstek, takich jak małe cząsteczki o wielkości 2 mikrometrów.

Rysunek 02: Urządzenie UPLC

Ponadto zapewnia szybszą analizę. W tej technice używamy ciśnienia pompy 100 MPa do wprowadzenia próbki do kolumny. Zatem to wysokie ciśnienie potwierdza, że ​​cała próbka jest wprowadzana do kolumny. Jest to zatem bardzo wydajne w porównaniu do HPLC.

Jaka jest różnica między HPLC a UPLC?

Termin HPLC oznacza wysokosprawną chromatografię cieczową, natomiast termin UPLC oznacza ultra wysokosprawną chromatografię cieczową. Dlatego technika UPLC jest rozwiniętą wersją HPLC. Zatem metoda działania jest taka sama dla obu technik. Jednak UPLC jest bardziej wydajny niż HPLC, ponieważ wykorzystuje wysokie ciśnienie pompy; ciśnienie pompy dla HPLC wynosi 40 MPA, podczas gdy dla UPLC wynosi 100 MPa. Dlatego jest to różnica między HPLC i UPLC. Przede wszystkim kluczową różnicą między HPLC i UPLC jest to, że HPLC pozwala na analizę cząstek o wielkości około 5 mikrometrów, podczas gdy UPLC pozwala na znacznie mniejsze cząstki o wielkości około 2 mikrometrów.

Podsumowanie - HPLC vs UPLC

UPLC jest formą HPLC. Zatem metody działania są takie same. Ale możemy znaleźć ulepszone funkcje w UPLC w porównaniu do HPLC. Dlatego istnieje pewna różnica między HPLC i UPLC. Jednak kluczowa różnica między HPLC i UPLC polega na tym, że HPLC pozwala na analizę cząstek o wielkości około 5 mikrometrów, podczas gdy UPLC pozwala na znacznie mniejsze cząstki o wielkości około 2 mikrometrów.

Odniesienie:

1. „Wysokosprawna chromatografia cieczowa”. Wikipedia, Wikimedia Foundation, 20 października 2018. Dostępne tutaj
2. „UPLC”. Wikipedia, Wikimedia Foundation, 25 października 2017 r. Dostępne tutaj  

Zdjęcie dzięki uprzejmości:

1. „Hplc” Autor: Kjaergaard z angielskiej Wikipedii (domena publiczna) przez Commons Wikimedia 
2. „Obraz urządzenia UPLC” Autor: Groep29 BFW - Praca własna, (domena publiczna) przez Commons Wikimedia