Różnica między HPLC i HPTLC

Kluczowa różnica - HPLC vs HPTLC
 

Kluczowa różnica między HPLC i HPTLC jest taka HPLC pozwala na ilościowe oddzielenie składników w próbce, podczas gdy HPTLC nie pozwala na ilościowe oddzielenie składników w próbce.

Chromatografia to metoda fizycznego rozdzielania stosowana do oddzielania i identyfikacji składników w mieszaninie. Zarówno HPLC, jak i HPTLC są technikami chromatograficznymi. HPLC to wysokosprawna chromatografia cieczowa. HPTLC to wysokosprawna chromatografia cienkowarstwowa.

ZAWARTOŚĆ

1. Przegląd i kluczowa różnica
2. Co to jest HPLC
3. Co to jest HPTLC
4. Porównanie obok siebie - HPLC vs HPTLC w formie tabeli
5. Podsumowanie

Co to jest HPLC?

HPLC jest wysokosprawna chromatografia cieczowa. Jest to technika analityczna stosowana do oddzielania, identyfikacji i oceny ilościowej składników w mieszaninie. W tej technice próbkę rozpuszcza się w odpowiednim rozpuszczalniku. Następnie rozpuszczalnik z próbką przepuszcza się przez pompę o danym ciśnieniu. Pompa jest wypełniona stałym materiałem adsorbującym. Następnie niektóre komponenty wiążą się silnie z materiałem chłonnym, podczas gdy inne komponenty wiążą się luźno. To powoduje, że komponenty mają różne prędkości przepływu przez pompę. Dlatego komponenty można łatwo oddzielić.

Rysunek 01: System HPLC

Materiał adsorbujący, który wypełnia pompę, jest znany jako faza stacjonarna. Rozpuszczalnik z rozpuszczoną próbką jest znany jako faza ruchoma. Pompa zastosowana w tej technice nosi nazwę kolumny. Kolumna jest wypełniona materiałem adsorbującym, najczęściej cząsteczkami krzemionki. Rozmiar tych cząstek może wynosić od 2–50 μm. Na proces rozdzielania wpływa skład fazy ruchomej i temperatura układu. Oddziaływania między fazą stacjonarną a składnikiem w próbce mogą być oddziaływaniami hydrofobowymi, oddziaływaniami dipol-dipol, wiązaniem jonowym itp..

Ciśnienie robocze HPLC jest znacznie wyższe niż w tradycyjnej chromatografii cieczowej. Leży około 50-350 barów. Różnica między chromatografią cieczową a HPLC polega na tym, że w chromatografii cieczowej próbka spada przez kolumnę pod wpływem grawitacji, podczas gdy w HPLC próbka jest poddawana ciśnieniu przez kolumnę. Rozmiar kolumny i cząstek chłonnych jest również bardzo mały w porównaniu z tradycyjną chromatografią cieczową. Jednak rozdzielczość podana za pomocą techniki HPLC jest lepsza.

Co to jest HPTLC?

HPTLC jest wysokosprawna chromatografia cienkowarstwowa. Jest to zaawansowana i zautomatyzowana forma tradycyjnej TLC. Ta technika zapewnia wydajną rozdzielczość w krótkim czasie. W tej metodzie analizy próbka i referencja mogą być analizowane w tym samym czasie, co pozwala na porównanie próbki z referencją. Daje to lepszą dokładność analityczną niż inne techniki chromatograficzne. Czas potrzebny na analizę jest krótszy. Technika ta jest techniką niskokosztową.

Rycina 02: Analiza barwników spożywczych za pomocą HPTLC

Metoda HPTLC jest prostym procesem, a etap przygotowania próbki jest również wyeliminowany (w tradycyjnej TLC etap przygotowania próbki jest zawarty przed rozdziałem. Ten etap obejmuje czyszczenie i wzbogacanie). Rozpuszczalnik można stosować bezpośrednio, bez jakiejkolwiek obróbki wstępnej, chociaż inne techniki chromatograficzne wymagają obróbki wstępnej, takiej jak odgazowanie, filtracja itp..

Materiałem adsorbującym stosowanym w HPTLC jest krzemionka o bardzo małych rozmiarach cząstek. W tradycyjnej TLC wielkość cząstek krzemionki wynosi 5-20 μm, natomiast w HPTLC 4-8 μm. Próbkę nakłada się na płytkę HPTLC za pomocą aplikatora. Zapewnia jednolitą i bezpieczną aplikację. Następnie płytki umieszcza się w komorze mającej fazę ruchomą. Komora powinna być nasycona parą fazy ruchomej. Po procesie HPTLC można wykryć poruszające się plamy. Podczas wykrywania plam na płytce technika HPTLC wykorzystuje odpowiedni region UV lub komorę jodu.

Jaka jest różnica między HPLC a HPTLC?

HPLC vs HPTLC
HPLC to wysokosprawna chromatografia cieczowa.	HPTLC to wysokosprawna chromatografia cienkowarstwowa.
Technika
W HPLC fazę ruchomą z rozpuszczalnikiem przepuszcza się przez kolumnę wypełnioną fazą stacjonarną.	W HPTLC próbka jest nakrapiana na płytce TLC i umieszczana w komorze zawierającej fazę ruchomą; następnie próbka może migrować w górę płytki wraz z fazą ruchomą.
Pomiary
W HPLC różnice między szybkościami przepływu składników przez kolumnę stosuje się do rozdzielenia składników w próbce.	W HPTLC różnice między odległościami przebytymi przez każdy składnik w próbce służą do oddzielenia składników w próbce.
Separacja ilościowa
HPLC pozwala na ilościowe rozdzielenie składników w próbce.	HPTLC nie pozwala na ilościowe rozdzielenie składników w próbce.

Podsumowanie - HPLC vs HPTLC

HPLC i HPTLC to dwie techniki chromatograficzne. Kluczowa różnica między HPLC i HPTLC polega na tym, że HPLC pozwala na ilościowe oddzielenie składników w próbce, podczas gdy HPTLC nie pozwala na ilościowe oddzielenie składników w próbce.

Odniesienie:

1. „Wysokosprawna chromatografia cieczowa”. Wikipedia, Wikimedia Foundation, 10 kwietnia 2018 r., Dostępna tutaj.
2. „HPTLC”. LinkedIn SlideShare, 30 maja 2011 r., Dostępny tutaj.

Zdjęcie dzięki uprzejmości:

1. „HPTLCplatetoMS” Autor: Kjaergaard z angielskiej Wikipedii - przeniesiony z en.wikipedia do Commons (domena publiczna) przez Commons Wikimedia
2. „Hplc” Autor: PD Dr. rer. nat. habil. Gertrud Morlock profesor nadzwyczajny (Privatdozentin) University of HohenheimInstitute of Food Chemistry - G. Morlock, C. Oellig, CAMAG Bibliography Service 103 (2009) przez Commons Wikimedia