Różnica między immunocytochemią a immunohistochemią

Kluczowa różnica - immunocytochemia vs immunohistochemia
 

Immunocytochemia (ICC) i immunohistochemia (IHC) to dwie szeroko stosowane techniki w diagnostyce molekularnej, które identyfikują i potwierdzają występowanie zarówno chorób niezakaźnych, jak i chorób zakaźnych w oparciu o markery molekularne obecne w komórkach. Kluczową różnicą w immunocytochemii i immunohistochemii jest cząsteczka stosowana jako procedura analizy w tych technikach. W ICC stosuje się pierwotne i wtórne przeciwciała skoniugowane ze markerami, takimi jak fluorescencja, natomiast IHC, przeciwciała monoklonalne i poliklonalne stosuje się do oznaczeń diagnostycznych.

ZAWARTOŚĆ

1. Przegląd i kluczowa różnica
2. Co to jest immunocytochemia
3. Co to jest immunohistochemia
4. Podobieństwa między immunocytochemią a immunohistochemią
5. Porównanie obok siebie - Immunocytochemia vs immunohistochemia w formie tabelarycznej
6. Podsumowanie

Co to jest immunocytochemia (ICC)?

ICC wykorzystuje pierwotne i wtórne przeciwciała związane z markerami, takimi jak markery fluorescencyjne lub enzymy, i jest skuteczną metodą wykrywania antygenów obecnych w komórkach docelowych, które mogą być zakaźnymi cząsteczkami komórkowymi lub rakowymi komórkami nowotworowymi. Do immunocytochemii wymagane są trzy rodzaje kontroli.

• Pierwotne przeciwciało - kontrola, która pokazuje specyficzność pierwotnego przeciwciała wiążącego się z antygenem
• Wtórne przeciwciało - kontrola, która pokazuje, że znacznik jest specyficzny dla pierwotnego przeciwciała
• Kontrola etykiet - pokaż, że etykietowanie jest wynikiem dodanej etykiety, a nie wynikiem etykietowania endogennego.

Rycina 01: Immunocytochemia oznacza poszczególne białka w komórkach (tutaj hydroksylaza tyrozyny w aksonach współczulnych autonomicznych neuronów jest pokazana na zielono).

Kontrola pierwotnego przeciwciała jest specyficzna dla każdego nowego przeciwciała i nie może być powtórzona dla każdego eksperymentu. Drugorzędowa kontrola przeciwciał jest zaprojektowana w oparciu o pierwotne przeciwciało wykorzystane w eksperymencie i jest dołączana do każdego eksperymentu. Kontrola etykietowania jest uwzględniana, jeśli zmieni się warunek procedury, próbka zostanie zmieniona lub gdy zostanie znalezione nieoczekiwane etykietowanie.

Dwa główne zastosowania ICC to Radio Immuno - Test (RIA) i Enzyme Linked Immunosorbent Test (ELISA). Najczęściej stosowanym przeciwciałem jest immunoglobulina G..

Co to jest immunohistochemia (IHC)?

W immunohistochemii próbka źródłowa zawiera przeciwciała monoklonalne i poliklonalne w celu określenia obecności antygenów w obcych komórkach. Ta technika opiera się na specyficznej reakcji wiązania antygenu z przeciwciałem. Przeciwciała stosowane w wykrywaniu mogą być znakowane różnymi markerami; mogą to być markery fluorescencyjne, radioznakowane lub chemiczne. Poprzez ułatwianie in vitro wiązanie między antygenem a docelowym przeciwciałem, można określić obecność lub nieobecność określonego białka komórki.

Rycina 02: Barwienie immunohistochemiczne normalnej nerki za pomocą CD10

Obecnie naukowcy są zaangażowani w opracowywanie docelowych przeciwciał dla specyficznych antygenów obecnych w komórkach, które mogą rozwijać się jako złośliwe komórki nowotworowe lub antygeny obecne w czynnikach zakaźnych, takich jak HIV.

Jakie są podobieństwa między immunocytochemią a immunohistochemią?

• Reakcje są wysoce specyficzne i dokładne w ICC i IHC.
• Zastosowania ICC i IHC obejmują diagnostykę raka i chorób zakaźnych.
• W obu warunkach należy zachować sterylne warunki i należy je wykonać w in vitro
• Obie techniki zapewniają powtarzalne wyniki.
• Oba są szybkie.
• Znakowanie radiowe i techniki fluorescencyjne są stosowane jako metody wykrywania zarówno w ICC, jak i IHC.
• Oba są oparte na parowaniu antygen-przeciwciało.

Jaka jest różnica między immunocytochemią a immunohistochemią?

Immunocytochemistry (ICC) vs Immunohistochemistry (IHC)
ICC wykorzystuje markery związane z pierwszorzędowymi i wtórnymi przeciwciałami, takimi jak markery fluorescencyjne lub enzymy, i jest skuteczną metodą wykrywania antygenów obecnych w komórkach docelowych.	IHC to metoda wykorzystująca przeciwciała monoklonalne i poliklonalne do określenia obecności antygenów, które są specjalnymi markerami białkowymi umieszczonymi na powierzchniach komórek.
Przykładowe źródło
Próbki pochodzące z tkanek przetworzonych histologicznie na cienkie skrawki stosuje się w ICC.	IHC wykorzystuje próbki składające się z komórek hodowanych w monowarstwie lub komórek w zawiesinie, które są osadzane na szkiełku.
Przetwarzanie próbki
W ICC komórki powinny być przepuszczalne, aby ułatwić penetrację przeciwciał do celów wewnątrzkomórkowych.	W IHC komórki są utrwalane w formalinie, zatapiane w parafinie przed barwieniem.

Podsumowanie - Immunocytochemistry vs. Immunohistochemistry

Diagnostyka molekularna służy do identyfikowania i potwierdzania występowania zarówno chorób niezakaźnych, jak i chorób zakaźnych na podstawie markerów molekularnych obecnych w komórkach. Markerami molekularnymi mogą być białka lub sekwencje DNA lub RNA; rozwój technologii takich jak ICC i IHC utorował naukowcom drogę do wczesnego wykrycia choroby i jej przyczyny. Zarówno ICC, jak i IHC zależą od specyficznych reakcji między przeciwciałem i antygenem, chociaż źródło próbki. Główną różnicą między immunocytochemią a immunohistochemią jest przetwarzanie próbek z dwóch procedur.

Pobierz wersję PDF Immunocytochemistry vs. Immunohistochemistry

Możesz pobrać wersję PDF tego artykułu i używać go do celów offline zgodnie z cytatem. Pobierz wersję PDF tutaj Różnica między immunocytochemią a immunohistochemią.

Bibliografia:

1. Burry, Richard W. „Controls for Immunocytochemistry: An Update”. Journal of Histochemistry and Cytochemistry, Publikacje SAGE, styczeń 2011, Dostępne tutaj. Dostęp 24 sierpnia 2017 r.
2. Duraiyan, Jeyapradha, i in. „Zastosowania immunohistochemii”. Journal of Pharmacy & Bioallied Sciences, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, sierpień 2012, dostępny tutaj. Dostęp 24 sierpnia 2017 r.

Zdjęcie dzięki uprzejmości:

1. „Immunohistochemia” autor: Swharden - Praca własna (CC BY-SA 3.0) przez Commons Wikimedia
2. „Kidney cd10 ihc” Autor: Nephron - Praca własna (CC BY-SA 3.0) przez Commons Wikimedia