Różnica między konkurencyjnym i niekonkurencyjnym testem ELISA

The kluczowa różnica między konkurencyjnym a niekonkurencyjnym testem ELISA jest to kompetycyjny test ELISA wykorzystuje antygen hamujący, podczas gdy niekonkurencyjny test ELISA nie wykorzystuje antygenu hamującego do testu.

Test immunoenzymatyczny (ELISA) to test immunologiczny, który wykrywa różne cele, takie jak przeciwciała, antygeny, białka i glikoproteiny. Jest to szybka i prosta metoda wykonania. Dlatego jest częściej wykorzystywany do celów badawczych i diagnostycznych. Test ELISA obejmuje zastosowanie enzymów i specyficzne wiązanie przeciwciała i antygenu. W zależności od tego, jak zachodzą reakcje, istnieją cztery rodzaje testu ELISA: bezpośredni test ELISA, pośredni test ELISA, test kanapkowy ELISA i test ELISA hamowania. Bezpośredni, pośredni i kanapkowy test ELISA są rodzajem niekonkurencyjnego testu ELISA, podczas gdy test hamowania ELISA jest rodzajem pełnego testu ELISA. Głównym celem tego artykułu jest omówienie różnicy między konkurencyjnym a niekonkurencyjnym testem ELISA.

ZAWARTOŚĆ

1. Przegląd i kluczowa różnica
2. Co to jest konkurencyjny test ELISA
3. Co to jest niekonkurencyjny test ELISA
4. Podobieństwa między konkurencyjnym i niekonkurencyjnym testem ELISA
5. Porównanie obok siebie - konkurencyjny vs niekonkurencyjny test ELISA w formie tabelarycznej
6. Podsumowanie

Co to jest konkurencyjny test ELISA?

Konkurencyjny test ELISA mierzy stężenie antygenu w próbce poprzez wykrywanie zakłóceń sygnału. W teście zastosowano antygen inhibitorowy. Jest to zatem rodzaj testu ELISA hamowania. Podczas tej procedury antygeny obecne w próbce konkurują z wybranym antygenem referencyjnym o wiązanie do określonej ilości znakowanego przeciwciała. Ponadto procedura ta rozpoczyna się od inkubacji próbki z nadmiarem znakowanego przeciwciała. Antygen referencyjny powinien być również wstępnie powleczony na płytce testowej z wieloma studzienkami. Następnie mieszaninę próbek należy dodać do płytki testowej, która zawiera antygen referencyjny. Wolne przeciwciała wiążą się z antygenem odniesienia w zależności od ilości antygenu w próbce. Zatem, jeśli obecna jest większa ilość antygenu próbki, wykryty zostanie mniej antygenu referencyjnego. W ten sposób tworzy słabszy sygnał.

Rycina 01: ELISA

Natomiast gdy próbka zawiera mniej antygenu, coraz więcej antygenów referencyjnych będzie zajmować przeciwciała i dawać silny sygnał. Ponieważ konkurencyjny test ELISA daje silniejszy sygnał, gdy próbka zawiera małą ilość antygenów, konkurencyjny test ELISA jest bardzo czułym testem, nawet w przypadku próbek z małą liczbą antygenów.

W niektórych konkurencyjnych zestawach ELISA zamiast znakowanego przeciwciała stosuje się znakowany antygen. Tutaj znakowany antygen i antygen próbki będą konkurować o wiązanie z pierwotnym przeciwciałem. Podobnie, gdy ilość antygenu w próbce jest niska, ilość znakowanego antygenu, który wiąże się z przeciwciałami, będzie wyższa i wytworzy silniejszy sygnał.

Co to jest niekonkurencyjny test ELISA?

Spośród czterech rodzajów testu ELISA trzy typy to niekonkurencyjny test ELISA. Są to bezpośrednie testy ELISA, pośrednie testy ELISA i kanapkowe testy ELISA. Wszystkie trzy formaty działają zgodnie ze wspólną zasadą testu ELISA, z niewielkimi różnicami w ich metodologii.

Bezpośredni test ELISA wykorzystuje przeciwciało pierwotne znakowane enzymem. Dlatego nie wymaga drugiego przeciwciała. Dlatego bezpośredni test ELISA jest szybszy niż inne rodzaje testu ELISA. Przeciwciało pierwotne będzie bezpośrednio wiązało się z unieruchomionym docelowym antygenem, który jest obecny na płytce. Stąd zachodzi reakcja enzym-substrat, wytwarzając widzialny sygnał.

Rycina 02: Test ELISA typu sandwich

W przeciwieństwie do bezpośredniego testu ELISA, w pośrednim teście ELISA stosuje się nieznakowane przeciwciało pierwotne i przeciwciało wtórne znakowane enzymem. Gdy pierwotne przeciwciało wiąże się z unieruchomionym antygenem, drugie przeciwciało wiąże się z pierwotnym przeciwciałem. Enzym w drugorzędowym przeciwciele będzie reagować z antygenem i wytwarzać widoczny sygnał. Test ELISA kanapkowy różni się od testu ELISA zarówno bezpośredniego, jak i pośredniego. Tutaj przeciwciało jest unieruchomione na ścianie płytki testowej.

Jakie są podobieństwa między konkurencyjnym i niekonkurencyjnym testem ELISA?

• Konkurencyjny i niekonkurencyjny test ELISA to dwa rodzaje technik testu immunosorbcyjnego.
• Są to wysoce elastyczne i wrażliwe techniki.
• Ponadto zarówno konkurencyjny, jak i niekonkurencyjny test ELISA są testami immunologicznymi powiązanymi z enzymem.
• Obie metody generują również sygnał w wyniku reakcji enzym-substrat.

Jaka jest różnica między konkurencyjnym a niekonkurencyjnym testem ELISA?

Konkurencyjny test ELISA jest rodzajem testu ELISA, który polega na zakończeniu między antygenem analitu a znakowanym antygenem dla ograniczonej ilości swoistego przeciwciała. Z drugiej strony nie ma takiej konkurencji między antygenem będącym przedmiotem zainteresowania a antygenem odniesienia w niekonkurencyjnym teście ELISA. Jest to zatem kluczowa różnica między konkurencyjnym a niekonkurencyjnym testem ELISA. Podobnie kompetycyjny test ELISA jest testem ELISA hamowania, podczas gdy niekonkurencyjny test ELISA nie jest testem ELISA hamowania. Jest to zatem różnica między konkurencyjnym i niekonkurencyjnym testem ELISA.

Ponadto konkurencyjny test ELISA jest bardziej odpowiedni do pomiaru niskiej ilości interesującego antygenu. To delikatna metoda. Z drugiej strony niekonkurencyjny test ELISA nie zależy od liczby antygenów obecnych w próbce. Dlatego jest to również różnica między konkurencyjnym a niekonkurencyjnym testem ELISA.

Poniższa infografika wyjaśnia względnie różnicę między konkurencyjnym a niekonkurencyjnym testem ELISA.

Podsumowanie - konkurencyjny vs niekonkurencyjny test ELISA

Konkurencyjny i niekonkurencyjny test ELISA to dwa główne typy testu ELISA lub testu immunoenzymatycznego. Podsumowując różnicę między konkurencyjnym i niekonkurencyjnym testem ELISA, konkurencyjny test ELISA opiera się na współzawodnictwie między antygenem będącym przedmiotem zainteresowania i antygenem referencyjnym w kierunku ograniczonej ilości przeciwciał. Dlatego konkurencyjny test ELISA jest również nazywany testem ELISA hamowania. Z drugiej strony niekonkurencyjny test ELISA nie opiera się na konkurencji między antygenami docelowymi i antygenami referencyjnymi. Wykorzystuje nadmiar znakowanego swoistego przeciwciała w stosunku do badanego analitu. Jest to zatem kluczowa różnica między konkurencyjnym a niekonkurencyjnym testem ELISA. Bezpośredni test ELISA, pośredni test ELISA i test kanapkowy ELISA to trzy główne typy niekonkurencyjnego testu ELISA.

Odniesienie:

1. Bio-Rad. „Rodzaje testu ELISA | Bio-Rad. ” Bio, dostępne tutaj.
2. „Cztery typy testu ELISA”. Cusabio Life Science - Twój partner w dziedzinie biologii, dostępny tutaj.

Zdjęcie dzięki uprzejmości:

„Elisa tipus” Autor: Carolfv333 - Praca własna (CC BY-SA 4.0) Commons Wikimedia.
„Test immunologiczny Sandwich, ELISA” Autor: NickCT - Praca własna (CC BY-SA 3.0) przez Commons Wikimedia