Różnica między CFU a MPN

Kluczowa różnica - CFU vs MPN
 

Jednostka tworząca kolonię (CFU) i najbardziej prawdopodobna liczba (MPN) to dwie metody stosowane do zliczania mikroorganizmów w próbkach. Oba parametry służą do wykrywania jakości wody i bakterii wskaźnikowych kału w próbkach wody. Jednostka tworząca kolonię jest miarą stosowaną do wyliczenia liczby żywotnych komórek bakteryjnych lub komórek grzybów w określonej objętości lub masie danej próbki. Standardową jednostką tego parametru jest CFU / ml lub CFU / g. Najbardziej prawdopodobna liczba to kolejna jednostka używana do pomiaru liczby żywotnych komórek bakteryjnych w próbce cieczy. Kluczowa różnica między CFU i MPN jest taka CFU oblicza się na podstawie kolonii bakteryjnych i grzybowych rosnących na stałej płytce agarowej podczas MPN oblicza się na podstawie żywych bakterii rosnących w płynnym podłożu.

ZAWARTOŚĆ

1. Przegląd i kluczowa różnica
2. Co to jest CFU 
3. Co to jest MPN
4. Porównanie obok siebie - CFU vs MPN w formie tabelarycznej
5. Podsumowanie

Co to jest CFU?

Jednostka tworząca kolonię (CFU) to parametr mierzący liczbę żywotnych komórek bakteryjnych lub grzybowych w danej próbce. Metodę liczenia jednostek tworzących kolonię określa się jako standardowa liczba płytek. Żywe kolonie pojawiające się na płytkach agarowych są wyrażane jako CFU na 1 ml (jednostka tworząca kolonię na mililitr) próbki w przypadku płynów lub CFU na 1 g (jednostka tworząca kolonię na jeden gram) próbki dla ciał stałych.

Istnieją dwie popularne metody pomiaru CFU w próbce. Oni są metoda posiewu i metoda nalewania. Te dwie metody są wspierane przez technikę zwaną seryjnym rozcieńczaniem. Seryjnie rozcieńczone próbki umożliwiają uzyskanie policzalnej liczby kolonii na powierzchni agaru. Znaną objętość próbki można rozprowadzić na powierzchni płytki agarowej lub zmieszać z agarem i przelać na płytkę. Płytkę następnie inkubuje się i zlicza powstające kolonie. Liczba kolonii odnosi się do liczby mikroorganizmów w pierwotnej próbce. Płytki, które pokazują zbyt wiele kolonii lub zbyt mało kolonii, są wyłączone z liczenia, ponieważ wyniki mogą nie być statystycznie dokładne na tych płytkach. Statystycznie najlepszy zakres to 30–300 kolonii na płytce agarowej. Dlatego należy wybrać właściwe płytki do dokładnego wyliczenia. Dla powyższej funkcji wykonuje się seryjne rozcieńczenie.

Po policzeniu liczby żywotnych kolonii na płytkach, CFU / ml można obliczyć za pomocą następującego równania.

CFU na ml pierwotnej próbki = liczba kolonii na współczynniku rozcieńczenia płytki X.

Współczynnik rozcieńczenia = (1 / rozcieńczenie płytki)

Na przykład, jeśli zdobędziesz 149 kolonii na talerzu 10^-4 rozcieńczenie, a następnie liczbę bakterii w 1 ml oryginalnej próbki można obliczyć w następujący sposób:

CFU / ml = (149) x (1/10^-4)

= 149 × 10⁴ lub 1490000

= 1,49 x 10⁶

Rysunek 01: Jednostka tworząca kolonię

Co to jest MPN?

The najbardziej prawdopodobna liczba jest alternatywną miarą dla CFU / ml. MPN szacuje również żywotność komórek w próbce cieczy. Liczy organizmy rosnące w płynnej hodowli i jest głównie techniką bakteriologiczną. Ta metoda jest szczególnie przydatna w przypadku próbek, które zawierają niskie stężenia komórek bakteryjnych; na przykład mleko, woda pitna itp. Wartość MPN jest wyrażona dla 100 ml objętości. MPN opiera się na metodzie statystycznej opartej na teorii prawdopodobieństwa. Istnieją tabele statystyczne zaprojektowane w celu znalezienia wartości MPN na 100 ml próbki. Te tabele pokazują wyniki przy 95% granicach ufności.

Wartość MPN jest obliczana po wykonaniu techniki zwanej metodą fermentacji wielokrotnej w probówce. Trzy zestawy probówek zawierające odpowiednią pożywkę hodowlaną zaszczepia się trzema różnymi objętościami próbki, takimi jak 10 ml, 1 ml i 0,1 ml i inkubuje w celu wzrostu. Po okresie inkubacji probówki są oceniane + (dodatnio) lub - (ujemnie) pod kątem obecności lub braku wzrostu. Wzór wyników dodatnich i ujemnych jest następnie porównywany z tabelą prawdopodobieństw statystycznych MPN w celu oszacowania liczby mikroorganizmów. Następnie podaje się wartość MPN dla 100 ml próbki. MPN jest szeroko stosowany do wykrywania bakterii coli obecnych w próbkach wody.

Rysunek 02: Tabela MPN

Jaka jest różnica między CFU a MPN?

CFU vs MPN
CFU jest miarą stosowaną do wyrażania liczby żywotnych kolonii bakteryjnych lub grzybowych w danej próbce.	MPN jest alternatywną miarą dla CFU i mierzy liczbę żywotnych komórek bakteryjnych w próbce cieczy.
Jednostka
CFU / ml lub CFU / g	MPN / 100 ml
Obliczenie
CFU oblicza się poprzez zliczenie liczby kolonii hodowanych na płytkach agarowych.	MPN oblicza się przez porównanie dodatnich i ujemnych wzorów probówek z tabelą statystyczną MPN.
Technika seryjnego rozcieńczania
Przed umieszczeniem próbek na płytkach agarowych wykonuje się seryjne rozcieńczenie.	Seryjne rozcieńczenie zwykle nie jest przeprowadzane przy obliczaniu MPN
Metody
Metoda posiewu posypkowego i metoda nalewania są dwoma rodzajami metod wykonywanych w celu uzyskania CFU.	Fermentacja w wielu probówkach to metoda prowadząca do uzyskania wartości MPN.

Podsumowanie - CFU vs MPN

Pomiar wzrostu drobnoustrojów jest wymagany z wielu powodów. W zakładach przetwórstwa spożywczego konieczne jest zmierzenie poziomu i rodzaju mikroorganizmów w żywności. W przemyśle spożywczym i medycynie należy zapewnić skuteczne stosowanie zabiegów sterylizacji. W oczyszczalniach ścieków wymagane jest rutynowe badanie liczby drobnoustrojów. Podczas optymalizacji procedury w biologii molekularnej konieczne jest zmierzenie liczby kolonii na płytkach. Istnieją zatem różne metody wyliczania i pomiaru wzrostu. CFU i MPN to dwie takie metody powszechnie stosowane w różnych dziedzinach. CFU jest miarą liczby żywotnych kolonii bakteryjnych i grzybowych obecnych w danej próbce. Oblicza się go przy użyciu standardowej metody liczenia płytek lub żywej metody liczenia płytek. MPN jest kolejną miarą, która wyraża liczbę komórek bakteryjnych obecnych w danej objętości próbki cieczy. Oblicza się go przy użyciu metody fermentacji z wieloma probówkami i tabeli MPN. To jest różnica między CFU a MPN.

Pobierz wersję PDF CFU vs MPN

Możesz pobrać wersję PDF tego artykułu i używać go do celów offline zgodnie z cytatami. Pobierz wersję PDF tutaj Różnica między CFU a MPN.

Bibliografia:

„Jednostka tworząca kolonię”. Wikipedia. Fundacja Wikimedia, 28 maja 2017 r. Internet. Dostępny tutaj. 01 czerwca 2017 r.
„Mikrobiologia - 014 - najbardziej prawdopodobna liczba”. Mikrobiologia - 014 - najbardziej prawdopodobna liczba | Program licencjacki mikrobiologii. N.p., n.d. Sieć. Dostępny tutaj. 01 czerwca 2017 r.

Zdjęcie dzięki uprzejmości:

1. ” Ręczne zliczanie CFU ”Autor: Quentin Geissmann - Praca własna (CC BY-SA 3.0) przez Commons Wikimedia
2. „OSC Microbio 00 EE MPNTable” Autor: CNX OpenStax - (CC BY 4.0) przez Commons Wikimedia