Różnica między testem białkowym Bradforda i Lowry'ego

The kluczowa różnica jest między tym test Bradforda i Lowry'ego Oznaczenie białka Bradforda opiera się na przesunięciu absorbancji barwnika Coomassie brylantowego błękitu G-250, natomiast oznaczenie białka Lowry opiera się na reakcji jonów miedzi (Cu +) wytwarzanych przez utlenianie wiązań peptydowych odczynnikiem Folina-Ciocalteu.

Test jest techniką analityczną, która pomaga scharakteryzować główne składniki funkcjonalne próbki. Zatem test może być testem jakościowym lub ilościowym. Wiele dziedzin, w tym medycyna laboratoryjna, farmakologia, biologia środowiska, biologia molekularna, biochemia i immunologia, rutynowo stosują tego rodzaju testy. Test białkowy Bradforda i Lowry'ego to dwa testy biochemiczne, które określają stężenie białka w roztworze próbki. Oba testy wykorzystują techniki kolorymetryczne w celu uzyskania wyników.

ZAWARTOŚĆ

1. Przegląd i kluczowa różnica
2. Co to jest test białkowy Bradforda
3. Co to jest test białka Lowry
4. Podobieństwa między testem białkowym Bradforda i Lowry'ego
5. Porównanie obok siebie - test białkowy Bradforda i Lowry'ego w formie tabeli
6. Podsumowanie

Co to jest test białkowy Bradforda?

Oznaczenie białka Bradforda jest szybką spektroskopową procedurą analityczną do analizy białka. Pokazuje wysoką dokładność podczas pomiaru stężenia białka w roztworze. Marion Bradford wprowadził tę procedurę w 1976 roku. W tym teście całkowita reakcja oparta jest na składzie aminokwasowym mierzonych białek. Innymi słowy, test białkowy Bradforda jest testem kolorymetrycznym. Wykorzystuje barwnik Coomassie w kolorze brylantowym. Stąd ten kolorymetryczny test białkowy zależy od przesunięcia absorbancji barwnika. Coomassie brilliant blue G-250 występuje w trzech formatach: kationowy (czerwony), anionowy (niebieski) i neutralny (zielony). W warunkach kwaśnych czerwona postać barwnika przekształca się w niebieski. Potwierdza to wiązanie białka. Jeśli białko nie jest obecne, roztwór może pozostać w brązowym kolorze.

Rycina 01: Test białka Bradforda

Test białka Bradforda różni się od innych testów białka, ponieważ jest mniej podatny na zakłócenia różnych związków chemicznych obecnych w roztworze białka. Związki te obejmują sód, potas, glukozę i sacharozę itp.

Co to jest test białka Lowry?

Test białka Lowry to test biochemiczny stosowany do określenia całkowitego poziomu białka w roztworze. Oliver H. Lowry jest osobą, która opracowała ten odczynnik w 1940 r. Procedura przedstawia całkowite stężenie białka w roztworze poprzez zmianę koloru proporcjonalną do stężenia białka w roztworze. Dlatego jest to również kolorymetryczny test białkowy.

Podstawą tej procedury jest reakcja między jonami miedzi (Cu +) wytwarzanymi przez utlenianie wiązań peptydowych a odczynnikiem Folina-Ciocalteu. Odczynnik ten zawiera także kwas fosfomolibdenowy i kwas fosforowo-wolframowy. Jednak mechanizm reakcji testu białka Lowry'ego nie jest dobrze poznany. Ale wiąże się to z utlenianiem reszt cysteiny, tryptofanu i tyrozyny przez redukcję odczynnika Folina-Ciocalteu.

Rycina 02: Test białka Lowry

Reszty cysteinowe przyczyniają się do absorbancji obserwowanej w teście białka Lowry, a reakcja prowadzi do powstania błyszczącej niebieskiej cząsteczki; heteropol niebieski molibdenowy. Redukcję tej cząsteczki mierzy się za pomocą absorbancji przy 660 nm. Stąd stężenie reszt cysteiny i tryptofanu, które obniżyło odczynnik Folina-Ciocalteu, dedukuje całkowite stężenie białka w roztworze.

Jakie są podobieństwa między testem białkowym Bradforda i Lowry'ego?

• Testy białkowe Bradforda i Lowry'ego określają stężenie białka w roztworze.
• Obie metody są metodami kolorymetrycznymi.
• Ponadto czułość obu metod jest wysoka.

Jaka jest różnica między testem białkowym Bradforda i Lowry'ego?

Test białkowy Bradforda i Lowry'ego to dwa typy testów określających stężenie białka w roztworze. Test białkowy Bradforda opiera się na przesunięciu absorbancji barwnika Coomassie brylantowego błękitu G-250, podczas gdy test białkowy Lowry zależy od reakcji jonów miedzi wytwarzanych przez utlenianie wiązań peptydowych z odczynnikiem Folina-Ciocalteu. Jest to więc kluczowa różnica między testem białkowym Bradforda i Lowry'ego. Test białka Bradford zajmuje 15 minut, aby uzyskać wynik, podczas gdy test białka Lowery zajmuje 40-60 minut, aby uzyskać wynik. Jest to zatem kolejna różnica między testem białka Bradforda i Lowry'ego. Ponadto test białkowy Bradforda zależy od składu aminokwasowego, podczas gdy test białkowy Lowry jest częściowo zależny od składu aminokwasowego. Dlatego jest to również różnica między testem białka Bradforda i Lowry'ego.

Poniżej inforaphic zawiera więcej szczegółów na temat różnicy między testem białkowym Bradforda i Lowry'ego.

Podsumowanie - test białkowy Bradford vs Lowry

Test jest techniką analityczną stosowaną do scharakteryzowania głównego składnika funkcjonalnego próbki. Test białkowy Bradforda i Lowry'ego to dwa rodzaje testów białkowych, które działają zgodnie z technikami kolorymetrycznymi. Zarówno testy białkowe Bradforda, jak i Lowry'ego określają stężenie białka w roztworze. Jednak kluczowa różnica między testem białkowym Bradforda i Lowry'ego polega na stosowanej przez nich technice kolorymetrycznej. W teście białkowym Bradford stosuje się błękit Coomassie brylantowy G-250, podczas gdy w teście białkowym Lowry stosuje się jony miedzi (Cu +) i odczynnik Folin-Ciocalteu. Ponadto metoda Bradforda daje szybkie wyniki niż test białka Lowry. Jednak obie metody są bardzo czułymi metodami i podlegają interferencjom różnych substancji.

Odniesienie:

1. „Canadian Journal of Botany”. Canadian Journal of Botany - 60 (7): 1046 - PDF, dostępny tutaj.
2. „Chemia testów białkowych”. Thermo Fisher Scientific - US, dostępny tutaj.

Zdjęcie dzięki uprzejmości:

1. „Test białka Bradforda” Autor: Helito - Praca własna (CC BY-SA 4.0) przez Commons Wikimedia