The kluczowa różnica jest to między studnią agarową a metodą dyfuzji krążków w metodzie dyfuzyjnej studzienki agarowej roztwór ekstraktu wprowadza się do otworu lub studzienki utworzonej na podłożu agarowym, natomiast w metodzie dyfuzji krążków agarowych krążek bibuły filtracyjnej zawierający roztwór testowy umieszcza się na powierzchni agaru.
Mikroorganizmy są czynnikami wielu chorób. Istnieją różne środki przeciwdrobnoustrojowe, które zabijają mikroorganizmy i hamują lub zatrzymują ich wzrost. Dostępne są różne metody badań przesiewowych i oceny w celu wykrycia aktywności przeciwdrobnoustrojowej. Wśród nich powszechnie stosuje się metody dyfuzji studni agarowej i metody dyfuzji krążków agarowych in vitro analiza, która jest metodą dyfuzyjną na agarze. Metody te są szeroko stosowane, ponieważ nie wymagają określonego sprzętu i dalszej oceny pod kątem odtwarzalności i standaryzacji. Obie metody zależą od dyfuzji środka przeciwdrobnoustrojowego przez podłoże agarowe.
1. Przegląd i kluczowa różnica
2. Co to jest metoda dyfuzji studni agarowej
3. Co to jest metoda dyfuzyjnego krążka agarowego
4. Podobieństwa między studzienką agarową a metodą dyfuzji dysku
5. Porównanie obok siebie - metoda Agar Well vs Disc Diffusion w formie tabelarycznej
6. Podsumowanie
Metoda dyfuzji studni agarowej jest jedną z najtańszych i najłatwiejszych in vitro testy aktywności przeciwdrobnoustrojowej. Stosując tę metodę, ekstrakty roślinne i ekstrakty drobnoustrojowe można badać przesiewowo pod kątem działania przeciwdrobnoustrojowego wobec patogennych gatunków drobnoustrojów. W tej metodzie płytkę agarową inokuluje się patogennymi gatunkami bakteryjnymi, stosując technikę płytki do rozprzestrzeniania. Odbywa się to poprzez rozprowadzenie znanej objętości roztworu drobnoustrojów na powierzchni agaru za pomocą szklanego rozrzutnika. Następnie tworzy się aseptycznie otwór lub studzienkę (średnica od 6 do 8 mm) za pomocą sterylnego świdra korkowego. Następnie studzienkę należy wypełnić roztworem ekstraktu (roztworem testowym), a następnie płytki należy inkubować w odpowiedniej temperaturze i odpowiednich warunkach. Po inkubacji roztwór ekstraktu przeciwdrobnoustrojowego stopniowo dyfunduje przez podłoże agarowe i hamuje wzrost badanych gatunków bakterii. Na koniec można zaobserwować strefę hamowania, a średnicę strefy przyjmuje się jako pomiar.
Podobnie jak metoda dyfuzji studni agarowej, metoda dyfuzji krążków agarowych jest również rutynowo stosowaną metodą badania wrażliwości na środki przeciwdrobnoustrojowe w laboratoriach. W tej metodzie krążek z bibuły filtracyjnej zawierający roztwór testowy jest przechowywany na podłożu agarowym. Wcześniej płytkę agarową należy zaszczepić badanym mikroorganizmem. Następnie krążek bibuły filtracyjnej, który zawiera znane stężenie roztworu ekstraktu, umieszcza się na pożywce agarowej. Następnie płytki inkubuje się w odpowiednich warunkach.
Rycina 02: Metoda dyfuzji dysku agarowego
Po inkubacji roztwór ekstraktu dyfunduje przez podłoże agarowe i hamuje wzrost drobnoustrojów. Po inkubacji mierzy się średnicę strefy hamowania i porównuje.
Metoda dyfuzji studni agarowej to test aktywności przeciwdrobnoustrojowej, w którym w pożywce agarowej tworzy się dziura i dodaje się do niej roztwór ekstraktu. Tymczasem metoda dyfuzji krążków agarowych jest testem działania przeciwdrobnoustrojowego, w którym krążek bibuły filtracyjnej zawierający znane stężenie roztworu ekstraktu umieszcza się na podłożu agarowym. Jest to więc kluczowa różnica między studnią agarową a metodą dyfuzji dyskowej. Dlatego roztwór ekstraktu dodaje się do studzienki agarowej lub otworu w metodzie dyfuzji studzienki agarowej, podczas gdy roztwór ekstraktu dodaje się do krążka bibuły filtracyjnej w metodzie dyfuzji tarczy agarowej. Zatem metoda dyfuzji studni agarowej nie wykorzystuje krążka bibuły filtracyjnej, podczas gdy metoda dyfuzji dyskietki agarowej nie tworzy otworów agarowych w pożywce agarowej.
Wcześniej przedstawiono porównanie różnic między studzienką agarową a metodą dyfuzji krążków.
Studzienki agarowe i metody dyfuzji dyskowej są dwoma rodzajami metod testowania wrażliwości na środki przeciwdrobnoustrojowe. Obie metody są proste i tanie metody in vitro. W agarze, w metodzie dyfuzji dołka, na podłożu tworzy się otwór lub dołek, a następnie do dołka dodaje się roztwór ekstraktu w celu oceny aktywności przeciwdrobnoustrojowej. Natomiast w metodzie dyfuzji krążków agarowych roztwór ekstraktu dodaje się do krążka bibuły filtracyjnej, a następnie umieszcza na powierzchni agaru. Jest to więc kluczowa różnica między studnią agarową a metodą dyfuzji dyskowej.
1. Balouiri, Mounyr i in. „Metody oceny działania przeciwdrobnoustrojowego in vitro: przegląd”. Journal of Pharmaceutical Analysis, Elsevier, 2 grudnia 2015, dostępny tutaj.
1. „Metoda rozpraszania agaru 1” Autor: Sommer36 - Praca własna (CC BY-SA 4.0) przez Commons Wikimedia