Różnica między transformacją a transfekcją

Transformacja a transfekcja
 

Transformacja i transfekcja to dwie proste techniki stosowane do wprowadzenia obcego genu do komórki gospodarza. Jednak techniki te zależą od typu systemu hosta lub wektora.

Co to jest transformacja komórek?

Transformacja jest techniką stosowaną do wprowadzania genów do komórek drożdży i bakterii. Ta technika zwykle powoduje dziedziczne zmiany w genach, a zatem ekspresja genu jest stała. Transformację bakteryjną po raz pierwszy wprowadził w 1928 roku Frederick Griffith. Następnie na początku lat 70. XX wieku zastosowano tę technikę E coli. Podczas procesu transformacji E coli, komórki moczy się w lodowatym roztworze CaCl₂₎. Ten krok sprawia E coli komórki kompetentne. Następnie kompetentne komórki miesza się z plazmidowym DNA i inkubuje na lodzie przez 20-30 minut. Następnie podaje się krótki szok termiczny, aby umożliwić przeniesienie DNA do komórki. Na koniec komórki umieszcza się w pożywce i inkubuje w 37 ° C przez 60-90 minut w celu ustalenia plazmidów. Po pomyślnym zakończeniu tych kroków transformowane komórki można umieścić na odpowiednim podłożu do namnażania komórek. Ponieważ transformacja jest uważana za nieefektywną technikę, nie można jej użyć do przygotowania banków klonów.

Co to jest transfekcja komórek?

Transfekcja jest metodą wprowadzania obcego genu, zwykle do komórek ssaków. Istnieją dwie metody transfekcji; mianowicie przejściowa transfekcja i stabilna transfekcja. W przejściowej transfekcji ekspresja genów jest dostępna przez ograniczony czas; zatem zmiana genu powoduje tymczasową ekspresję. Ta metoda transfekcji jest prosta i szybka; dlatego może być używany rutynowo. Wadą przejściowej transfekcji jest trudność zastosowania w systemach syntezy białek na dużą skalę.

Podczas stabilnej transfekcji gen docelowy jest zintegrowany z genomem komórki gospodarza, a zatem ekspresja genu jest stała, w przeciwieństwie do przejściowej transfekcji.

Jaka jest różnica między transformacją a transfekcją?

• Transformacja to wprowadzenie genu do komórki prokariotycznej (bakteryjnej i drożdżowej), podczas gdy transfekcja jest zwykle nazywana wprowadzeniem genu do komórki ssaczej.

• Transformacja powoduje dziedziczną zmianę genów, podczas gdy transfekcja może skutkować tymczasową ekspresją lub trwałymi zmianami genów.