The kluczowa różnica to między całkowitą liczbą komórek a liczbą żywych komórek całkowita liczba komórek szacuje wszystkie komórki, w tym zarówno żywe, jak i martwe komórki drobnoustrojów w próbce, podczas gdy liczba żywych komórek szacuje tylko żywe komórki drobnoustrojów w próbce.
Liczenie liczby organizmów w populacji uważa się za niezbędne w przypadku większości prac eksperymentalnych. Dlatego staramy się analizować liczbę drobnoustrojów w próbce, stosując metody bezpośrednie i pośrednie. Pomiary bezpośrednie obejmują metody zliczania numerów komórek bezpośrednio. Pomiary pośrednie obejmują pomiar niektórych parametrów, które mogą być związane z liczbą komórek, takich jak gęstość komórek, masa sucha itp. Niektóre metody określają ilościowo tylko żywe komórki drobnoustrojów w próbce. Żywotna liczba komórek jest jedną z takich metod. Bezpośrednie zliczenia mikroskopowe określają ilościowo wszystkie komórki w znanej objętości pożywki / próbki za pomocą mikroskopu. Dlatego liczy zarówno żywe, jak i martwe komórki. Jest to rodzaj całkowitej liczby komórek.
1. Przegląd i kluczowa różnica
2. Co to jest całkowita liczba komórek
3. Co to jest Viable Cell Count
4. Podobieństwa między całkowitą liczbą komórek a żywotną liczbą komórek
5. Porównanie obok siebie - łączna liczba komórek a liczba komórek zdolnych do życia w formie tabelarycznej
6. Podsumowanie
Całkowita liczba komórek to metoda polegająca na zliczeniu wszystkich komórek w znanej objętości pożywki / próbki za pomocą mikroskopu i komory zliczającej (hemocytometr). W przeciwieństwie do liczby żywych, liczy się zarówno żywe, jak i martwe komórki. Dlatego jest to całkowita liczba, chyba że podczas obserwacji zostanie nałożona plama żywotności. W mikroskopii komórki obserwuje się bezpośrednio pod mikroskopem i zlicza. Wykorzystuje zawiesinę komórek, która składa się z komórek drobnoustrojów. Aby ułatwić liczenie i dokładne pomiary, można wykonać rozcieńczenie próbki. W bardzo wysokich / niskich stężeniach komórek uzyskanie całkowitej liczby komórek za pomocą mikroskopu jest trudnym zadaniem.
Ryc. 01: Komora zliczająca - hemocytometr
Zliczanie komór jest łatwe, niedrogie i szybkie w obliczaniu całkowitej liczby komórek. Co najważniejsze, komory zliczające są przydatne do zliczania zarówno eukariontów, jak i prokariotów. Liczymy komórki w wybranych kwadratach o znanej objętości, aby obliczyć całkowitą liczbę komórek.
Żywotna liczba komórek to metoda zliczania żywych komórek drobnoustrojów w próbce. Liczy tylko żywe komórki w próbce. Przydatna liczba płytek, filtracja membranowa i najbardziej prawdopodobna liczba to kilka wykonalnych technik zliczania komórek. Podejścia te są oparte na wzroście. Metoda żywej liczby płytek jest skuteczną metodą stosowaną w wielu dziedzinach mikrobiologicznych, w tym w mikrobiologii żywności i nabiału, mikrobiologii medycznej, mikrobiologii środowiska, genetyki drobnoustrojów, rozwoju pożywek i biotechnologii.
Najczęstszym sposobem zliczania żywych bakterii jest użycie próbki zdolnej do tworzenia kolonii na pożywce agarowej. Istnieją dwa główne sposoby obliczania liczby płytek: technika wysiewu i technika nalewania. Znaną objętość próbki można rozprowadzić na powierzchni płytki agarowej lub zmieszać z agarem. Płytkę następnie inkubuje się i zlicza powstające kolonie. Liczba kolonii jest związana z liczbą mikroorganizmów w pierwotnej próbce. Żywe liczby mierzą tylko te komórki, które żyją i rosną.
Ryc. 02: Licznik żywotnych płyt
Najbardziej prawdopodobna liczba (MPN) jest alternatywą dla metod zliczania płytek do szacowania gęstości populacji żywotnych komórek. Liczy organizmy rosnące w hodowli płynnej, a zatem jest głównie techniką bakteriologiczną. Jest to szczególnie przydatne w przypadku niskich stężeń organizmów, np. mleko, woda pitna.
Technika filtracji membranowej jest bardziej odpowiednia, gdy drobnoustroje są bardzo rozcieńczone, jak w miejskich wodociągach. Odbywa się to po prostu przepuszczając znaną objętość cieczy przez filtr i inkubując ją na pożywce. Kolonie rozwijające się na filtrze są zliczane i obliczane są bakterie na mililitr próbki.
Całkowita liczba komórek wylicza wszystkie żywe i martwe komórki drobnoustrojów w próbce. Natomiast liczba żywych komórek wylicza tylko żywe komórki w próbce. Jest to więc kluczowa różnica między całkowitą liczbą komórek a liczbą żywych komórek. Całkowita liczba komórek jest niezależna od wzrostu kolonii na płytkach agarowych, podczas gdy liczba żywych komórek jest techniką opartą na wzroście i zależy od wzrostu kolonii drobnoustrojów na płytkach agarowych.
Poniższa grafika informacyjna podsumowuje różnicę między całkowitą liczbą komórek a liczbą żywych komórek.
Całkowita liczba komórek wylicza zarówno żywe, jak i martwe komórki drobnoustrojów, podczas gdy liczba żywych komórek wylicza tylko żywe komórki. Jest to zatem kluczowa różnica między całkowitą liczbą komórek a liczbą żywych komórek. Również żywotna liczba komórek jest techniką opartą na wzroście, w przeciwieństwie do całkowitej liczby komórek. Ponadto wymaga inkubacji płytek, aż do uzyskania widocznych kolonii. Rentowna liczba płytek, MPN i filtracja membranowa to kilka technik liczenia żywotnych komórek, podczas gdy bezpośrednia mikroskopia i zastosowanie hemocytometru to dwie techniki całkowitej liczby komórek.
1. „Liczenie bakterii”. Lumen, dostępny tutaj.
1. „Hemocytometr” autorstwa Todda - pierwotnie opublikowany w serwisie Flickr jako 0356 (CC BY-SA 2.0) przez Commons Wikimedia
2. „Verdünnungsreihe mit Ausplattieren” Autor: Leberechtc - Praca własna (CC BY 3.0) przez Commons Wikimedia