The kluczowa różnica między wektorami insercyjnymi i zastępczymi jest to, że wektor insercyjny ma zdolność wstawiania obcego DNA o umiarkowanej długości, podczas gdy wektor zastępczy ma zdolność przyjmowania większych długości obcego DNA.
Wektory fagowe to bakteriofagi stosowane do klonowania. Istnieją dwa rodzaje wektorów fagowych; są to wektor wstawiania i wektor zastępczy. Ponadto wszystkie wektory fagowe składają się z nieistotnych genów. Jednak te geny muszą zostać usunięte z fagów, aby ułatwić nowe wstawki obcego DNA.
1. Przegląd i kluczowa różnica
2. Co to są wektory wstawiania
3. Co to są wektory zastępcze
4. Podobieństwa między wektorami wstawiania i zastępowania
5. Porównanie obok siebie - Wstawianie vs Wektory zastępcze w formie tabelarycznej
6. Podsumowanie
Przede wszystkim wektor insercyjny jest najprostszą formą wektorów do klonowania lambda. W rzeczywistości jest to rodzaj wektora fagowego, który ma unikalne miejsce restrykcyjne wprowadzone do genomu wektora w pozycji opcjonalnego DNA. Ponadto DNA faga pozostaje bez usuwania. To nieusunięcie fagowego DNA ogranicza wielkość wstawek (obcy DNA) do klonowania w wektorze. Ponadto wektory te są przydatne w klonowaniu i ekspresji cDNA. GT10, GT11 i Zap są przykładami tego wektora.
Ryc. 01: Fag Lambda
Wektor wstawiania składa się z jednego miejsca rozpoznawania. Podstawową funkcją tego wektora jest opracowanie bibliotek cDNA pochodzących z eukariotycznych sekwencji mRNA. Co więcej, może pomieścić tylko długości obcego DNA w zakresie od 05-11 kb. Ponadto posiada unikalne miejsce cięcia do wstawiania obcego DNA.
Wektor zastępczy lub wektor podstawienia jest rodzajem wektora fagowego opracowanym w wyniku usunięcia środkowego regionu „fragmentu wypełniacza” DNA faga. Pożądana obca wstawka DNA zastępuje DNA faga.
Rysunek 02: Wektor zastępczy
Wektory zastępcze są ważne w tworzeniu bibliotek genomowych, takich jak EMBL4 i Charon40. Wektory te mogą pomieścić większą długość obcego DNA w zakresie od 08-24 kb. Region wypełniacza składa się również z genu, który sprawia, że wektor faga jest nieżywotny w gospodarzu bakteryjnym.
Wstawianie a wektory zastępcze | |
Wektor insercyjny jest rodzajem wektora fagowego, który ma miejsce restrykcyjne wprowadzone do genomu faga w miejscu opcjonalnego DNA. | Wektor zastępczy to rodzaj wektora fagowego opracowany w wyniku usunięcia środkowego regionu „fragmentu wypełniacza” DNA faga |
Rozmiar wstawianych fragmentów | |
Długość 05-11 kb | Długość 08-24 kb |
Fragment Wypełniacza | |
Bez fragmentu wypełniacza | Fragment wypełniacza zostaje zastąpiony obcą wstawką |
Funkcjonować | |
Ważne, aby utworzyć biblioteki cDNA | Ważne przy tworzeniu bibliotek genomu |
Przykłady | |
GT10, GT11 i Zap są przykładami | EMBL4 i Charon40 są przykładami |
Strona rozszczepienia | |
Unikalna strona dekoltu jest obecna | Miejsce rozszczepiania zawiera geny, które nie są niezbędne dla cyklu litycznego |
Zarówno wektory insercyjne, jak i zastępcze są dwoma typami wektorów fagowych. Oba wektory mają miejsca restrykcyjne, które ułatwiają przyjmowanie nowych obcych wstawek DNA. Wektory insercyjne są ważne w tworzeniu bibliotek cDNA, podczas gdy wektory zastępcze są ważne w tworzeniu bibliotek genomowych. Ponadto wektory insercyjne akceptują wstawki DNA o umiarkowanej długości. Ale wektory zastępcze mogą pomieścić większe długości obcych wstawek DNA. Ogólnie rzecz biorąc, jest to kluczowa różnica między wektorami wstawiania i zastępowania.
1. Hasty, P, i in. „Skuteczność insercji w porównaniu do wektorów docelowych zastępujących zmienia się w różnych loci chromosomalnych.” Molecular and Cellular Biology, U.S. National Library of Medicine, grudzień 1994, dostępny tutaj.
2. „Wektory wstawiania lambda”. Biologia 335 Notatki z wykładu - wektory lambda, dostępne tutaj.
3. „Wektor zastępczy”. Wektor zastępczy - Terminologia biologii molekularnej dla wektora zastępczego - GenScript, dostępny tutaj.
1. „Fag lambda” autor: Lizanne Koch - własna praca z ChemBioDraw (domena publiczna) za pośrednictwem Commons Wikimedia