Różnica między HPLC a szybką HPLC

The kluczowa różnica to między HPLC a szybką HPLC ciśnienie pompy, którego używamy do HPLC, wynosi około 40 MPa, podczas gdy ciśnienie pompy do szybkiego HPLC wynosi około 3-5 MPa.

Najpopularniejszą techniką stosowaną do rozdzielania składników mieszaniny jest „chromatografia cieczowa”. Aby osiągnąć ten cel, istnieje kilka technik, z których HPLC jest bardzo popularna. HPLC oznacza wysokosprawną chromatografię cieczową, która identyfikuje, ocenia ilościowo i oddziela składniki ciekłej mieszaniny w szybki i wydajny sposób. Szybka HPLC to specjalna aplikacja HPLC, która ostatnio zwróciła uwagę osób zajmujących się badaniem rozwiązań.

ZAWARTOŚĆ

1. Przegląd i kluczowa różnica
2. Co to jest HPLC
3. Co to jest Fast HPLC
4. Porównanie obok siebie - HPLC vs Szybka HPLC w formie tabelarycznej
5. Podsumowanie

Co to jest HPLC?

HPLC to wysokosprawna chromatografia cieczowa. Wykorzystuje wysokie ciśnienie do przepychania rozpuszczalników, tak aby przechodziły przez kolumnę. Jest to również idealny sposób na oddzielenie i badanie różnych związków, takich jak aminokwasy, kwasy nukleinowe, węglowodany, sterydy, antybiotyki i węglowodory. HPLC ma wiele zalet w porównaniu z innymi metodami rozdzielania mieszanin, takimi jak wyższa rozdzielczość i szybsza analiza. Eliminuje potrzebę przepakowywania i regeneracji oraz oferuje lepszą kontrolę nad parametrami, a tym samym zwiększenie wydajności separacji. Idealnie, HPLC nadaje się do zastosowań na dużą skalę, ponieważ może oddzielać bardzo małe cząsteczki i umożliwia stosowanie wysokich ciśnień, które ułatwiają przepływ rozpuszczalników.

Rycina 01: Kolumna HPLC

W skrócie, sposób działania techniki HPLC jest następujący. Najpierw powinniśmy wprowadzić próbkę do strumienia fazy ruchomej w dyskretnych małych ilościach za pomocą pompy. Ciśnienie pompy powinno być utrzymywane na poziomie 40 MPa. Ten strumień fazy ruchomej przenika przez kolumnę HPLC. Następnie składniki w próbce również przechodzą przez kolumnę. Jednak ich prędkości ruchu różnią się od siebie ze względu na różnicę w interakcjach między składnikami próbki a adsorbentem wewnątrz kolumny. Ten adsorbent nazywamy fazą stacjonarną, ponieważ znajduje się on wewnątrz kolumny (nie porusza się). Następnie na końcu kolumny możemy pobrać próbkę, która wymywa się z kolumny, dzięki czemu możemy osobno zebrać składniki w próbce.

Co to jest Fast HPLC?

Niedawno naukowcy z instytutu badawczego Schering Plough opracowali szybką technikę HPLC, która jest zaawansowaną wersją HPLC, ponieważ pozwala na jeszcze szybsze oddzielanie związków od mieszaniny. Technika ta, znana również jako szybka HPLC, wykorzystuje 2,7 μm stopionych cząstek krzemionki rdzeniowej, które wytwarza się przez stopienie 0,5 μm porowatej krzemionki z cząsteczką stałej krzemionki. Te unikalnie wykonane cząstki sprawiają, że procedura separacji jest bardzo szybka i to przy niskim przeciwciśnieniu niż to, co stosujemy w HPLC.

Rycina 02: Aparat FPLC

Szybka HPLC daje wyniki porównywalne z UPLC, ale naukowcy uważają, że ta technika jest lepsza, ponieważ nie wymaga bardzo kosztownego sprzętu o ultrawysokim ciśnieniu. Wspaniałe jest to, że szybkie HPLC nie wymaga żadnych nowych protokołów laboratoryjnych.

Jaka jest różnica między HPLC a szybką HPLC?

HPLC to wysokosprawna chromatografia cieczowa, a szybka HPLC jest zaawansowaną formą wysokosprawnej chromatografii cieczowej. Kluczowa różnica między HPLC a szybką HPLC polega na tym, że ciśnienie pompy, które stosujemy do HPLC, wynosi około 40 MPa. Natomiast ciśnienie pompy do szybkiego HPLC wynosi około 3-5 MPa. Ponadto możemy rozdzielić różne związki, takie jak aminokwasy, kwasy nukleinowe, węglowodany, steroidy, antybiotyki i węglowodory, stosując technikę HPLC, podczas gdy technika szybkiej HPLC jest stosowana głównie do rozdziału białek.

Poniższa infografika przedstawia więcej informacji na temat różnicy między HPLC a szybką HPLC.

Podsumowanie - HPLC vs Szybka HPLC

HPLC to technika chromatografii cieczowej, która stała się bardzo popularna na całym świecie. Fast HPLC to nowa wersja HPLC, naukowcy z Schering Plough Institute opracowali tę nową technikę. Kluczowa różnica między HPLC a szybkim HPLC polega na ciśnieniu pompy stosowanym do rozdzielania. To jest; ciśnienie pompy, którego używamy do HPLC, wynosi około 40 MPa. Ale ciśnienie pompy do szybkiego HPLC wynosi około 3-5 MPa.

Odniesienie:

1. „Wysokosprawna chromatografia cieczowa”. Wikipedia, Wikimedia Foundation, 20 października 2018. Dostępne tutaj 
„Potrzebujesz fantazyjnego systemu, aby szybko uruchomić HPLC - a może?” Szybka HPLC - CHROMacademy. Dostępny tutaj  

Zdjęcie dzięki uprzejmości:

1. „HPLC kolom” Door Jmave, rcvanwijk - Eigen werk, (Public Domain) przez Commons Wikimedia  
2. „Lab's FPLC” Stephen Helms z Dallas, Teksas, Stany Zjednoczone - FPP Our Lab, (CC BY-SA 2.0) przez Commons Wikimedia