W kontekście mikroskopii barwienie jest uważane za niezbędny krok podczas wzmacniania kontrastu obrazu mikroskopowego, szczególnie w celu podkreślenia różnych struktur w tkankach biologicznych. Podczas barwienia rozmazów krwi obwodowej i szpiku kostnego stosuje się plamy Wrighta i Giemsy. Te plamy są znane jako plamy Romanowskiego. Obie te plamy składają się z ważnych składników: utlenionego błękitu metylenowego, eozyny Y i barwników lazurowych B. Zadaniem błękitu metylenowego i lazuru B jest wybarwienie jądra kolorami od niebieskiego do fioletowego. Plamy te są szeroko stosowane podczas badań morfologii czerwonych krwinek i podczas wykonywania różnicowej liczby białych krwinek. Diagnozę różnych stanów chorobowych, takich jak białaczka, można uzyskać za pomocą procedur barwienia Romanowskiego. Barwienie metodą Wrighta stosuje się do różnicowania komórek krwi, które składają się z mieszaniny eozyny i barwników błękitu metylenowego. Barwienie Giemsa jest wykorzystywane podczas barwienia komórek bakteryjnych, a także komórek ludzkich i może być połączone z barwieniem Wrighta w celu opracowania barwienia Giemsa Wright. Jest to kluczowa różnica między plamą Giemsa a plamą Wrighta.
Barwnik Giemsa stosuje się w diagnostyce cytogenetycznej i histopatologicznej pasożytów malarii i innych chorób pasożytniczych. Plamę Giemsa można również uznać za podstawową plamę w klasyfikacji chłoniaków w klasyfikacji Kiel. Barwienie metodą Giemsa jest potrzebne do pasmowania Giemsa, które jest powszechnie znane jako pasmowanie G. Paskowanie Giemsa służy do barwienia chromosomów, a także do tworzenia kariogramów. Nieprawidłowości chromosomalne, takie jak translokacje i rearanżacje, są identyfikowane za pomocą pasmowania Giemsa. Barwienie Giemsa jest stosowane w histologii ze względu na jego wysokiej jakości barwienie błony jądrowej i chromatyny, metachromazję niektórych składników komórkowych oraz różne cechy barwienia cytoplazmatycznego w zależności od typu komórki.
Ryc. 01: Plama Giemsa
Roztwór Giemsa zawiera błękit metylenowy, Azure B i eozynę, a barwnik przygotowuje się komercyjnie przy użyciu proszku Giemsa. Trwałość plamy zależy od lazenu metylenowego i jego mieszaniny wraz z błękitem metylenowym, który tworzy eozynat. Barwienie Giemsa jest szczególne dla grup fosforanowych w nici DNA i wiąże się z obszarami, w których występuje duża ilość wiązań adenina-tymina. W metodzie barwienia Giemsa cienką warstwę próbki umieszcza się początkowo na szkiełku mikroskopowym wraz z kilkoma kroplami czystego metanolu na około 30 sekund. Następnie szkiełko zanurza się w 5% roztworze bejcy Giemsa, który jest przygotowywany na świeżo, na około 20-30 minut. Na koniec szkiełko myje się wodą z kranu i pozostawia do wyschnięcia. Plama Giemsa jest znana jako plama różnicowa, ponieważ plama Wrighta-Giemsa powstaje, gdy plama Wrighta jest łączona z Giemsą. Dlatego może być stosowany w badaniu patogennych bakterii przyczepionych do komórek ludzkich. Tutaj komórki ludzkie i komórki bakteryjne są barwione z szacunkiem i obserwowane są odpowiednio fioletowe i różowe kolory.
Plama Wrighta nosi imię Jamesa Homera Wrighta, który zmodyfikował plamę Romanowskiego. Barwienie Wrighta służy do różnicowania typów komórek krwi, ponieważ pomaga odróżnić typy komórek krwi. W rezultacie infekcje można zdiagnozować, obserwując liczbę białych krwinek. Bejca to mieszanina eozyny, która jest koloru czerwonego i barwników błękitu metylenowego. Barwienie Wrighta służy do barwienia i obserwowania próbek moczu, rozmazów krwi obwodowej i aspiracji szpiku kostnego pod mikroskopem świetlnym. Barwienie Wrighta jest używane do barwienia chromosomów w cytogenetyce w celu promowania diagnozy wielu chorób i zespołów. Próbki moczu zabarwione barwnikiem Wrighta identyfikują eozynofile wskazujące na zakażenie dróg moczowych.
Rycina 02: Plama Wrighta
W procesie barwienia Wrighta przygotowuje się osuszony powietrzem film krwi, a barwienie Wrighta nakłada się i pozostawia na 3 minuty. Następnie dodaje się bufor równej ilości plamy, delikatnie miesza i pozostawia na 5 minut. Szkiełko jest trzymane poziomo i dobrze umyte neutralną wodą destylowaną. Na koniec suszy się i obserwuje pod mikroskopem.
Giemsa Stain vs Wright Stain | |
Barwienie metodą Giemsa to technika barwienia różnicowego stosowana przede wszystkim do barwienia komórek bakteryjnych, a także komórek ludzkich. | Barwienie Wrighta jest techniką barwienia różnicowego stosowaną głównie w procedurach barwienia rozmazów krwi, próbek moczu i aspiracji szpiku kostnego. |
Barwienie jest podstawową techniką laboratoryjną stosowaną podczas mikroskopii, która jest wykorzystywana do zwiększenia kontrastu obrazu mikroskopowego. Barwienie Giemsa i Barwienie Wrighta, znane jako barwienie Romanowskiego, polegają na wykonywaniu różnicowej liczby białych krwinek i badaniu morfologii krwinek czerwonych. Barwniki utlenionego błękitu metylenowego, eozyny Y i lazurowego B są ważnymi składnikami barwników Romanowsky'ego. Przede wszystkim barwienie Giemsa jest wykorzystywane podczas barwienia komórek bakteryjnych, ale może być również stosowane w przypadku komórek ludzkich. Barwienie Wrighta jest szeroko stosowane podczas barwienia rozmazów krwi, próbek moczu i aspiracji szpiku kostnego. Na tym polega różnica między plamą Giesmy a plamą Wrighta.
Możesz pobrać wersję PDF tego artykułu i używać go do celów offline zgodnie z cytatem. Pobierz wersję PDF tutaj Różnica między plamami Giemsa a Plamami Wrighta
1. Barcia, J. J. „Plama z Giemsy: jej historia i zastosowania”. Międzynarodowe czasopismo z zakresu patologii chirurgicznej., US Library of Medicine, lipiec 2007, dostępne tutaj. Dostęp 12 września 2017 r
2. Kraft, K P i S E Pambuccian. „Barwienie Romanowskiego w cytopatologii: historia, zalety i ograniczenia”. Biotechnika i histochemia: oficjalna publikacja Biological Stain Commission., U.S. National Library of Medicine, kwiecień 2011, dostępna tutaj. Dostęp 12 września 2017 r
1. „Trypanosoma-evansi-rat-blood-Giemsa-stain” Autor: Alan R Walker - Praca własna (CC BY-SA 3.0) przez Commons Wikimedia
2. „Mast Cell, Aspirate Bone Marrow, Wright Stain (5916735712)” Ed Uthman z Houston, Teksas, USA - Mast Cell, Aspirate Bone Marrow, Wright Stain Przesłane przez CFCF (CC BY 2.0) przez Commons Wikimedia