The kluczowa różnica między amplifikacją genów a klonowaniem genów jest to, że amplifikacja genu to proces tworzenia wielu kopii interesującego genu in vitro przez reakcję łańcuchową polimerazy. Ale klonowanie genów to proces tworzenia wielu kopii interesującego genu in vivo przez wytworzenie rekombinowanego plazmidu i przekształcenie go w bakterię gospodarza.
Gen jest specyficznym fragmentem DNA, który koduje białko. Organizm ma tysiące genów. Ponadto możliwe jest zwielokrotnienie sekwencji DNA ważnych genów przy użyciu technik biologii molekularnej. Amplifikacja genów i klonowanie genów to dwie takie procedury. Obie procedury dają wiele kopii interesującego genu. Istnieje jednak różnica między amplifikacją genów a klonowaniem genów pod względem ich metodologii.
1. Przegląd i kluczowa różnica
2. Co to jest amplifikacja genów
3. Co to jest klonowanie genów
4. Podobieństwa między amplifikacją genów a klonowaniem genów
5. Porównanie obok siebie - amplifikacja genów vs klonowanie genów w formie tabelarycznej
6. Podsumowanie
Amplifikacja genu to proces tworzenia kopii określonego genu przy użyciu reakcji łańcuchowej polimerazy. Aby amplifikować gen, DNA tego konkretnego organizmu należy wyekstrahować przy użyciu odpowiedniego protokołu ekstrakcji DNA. Następnie ekstrahowany dwuniciowy DNA powinien zostać zdenaturowany, aby uzyskać oddzielone pojedyncze nici. Kolejny etap obejmuje zastosowanie reakcji PCR do wykonania kopii genu będącego przedmiotem zainteresowania. Ponadto, mieszanina PCR zawiera wymagane startery, nukleotydy, enzym polimerazy DNA, matrycowy DNA i inne składniki. Pod koniec programu ChRL następuje amplifikacja genu będącego przedmiotem zainteresowania.
Rycina 01: Amplifikacja genów
Co więcej, amplifikacja genów jest początkowym etapem wykrywania określonej sekwencji, identyfikacji organizmu, diagnozowania chorób i tworzenia bibliotek genów itp..
Klonowanie genów to metoda inżynierii genetycznej służąca do tworzenia bibliotek genów lub tworzenia wielu kopii interesującego genu. Proces ten obejmuje wytworzenie rekombinowanego plazmidu i transformację rekombinowanego plazmidu w komórkę gospodarza, zwłaszcza komórkę bakteryjną. Klon jest identyczną kopią oryginalnego organizmu lub cząsteczki. Klonowanie genów może tworzyć tysiące klonów genów.
Rycina 02: Klonowanie genów
Po zidentyfikowaniu genu będącego przedmiotem zainteresowania można go oddzielić od genomu konkretnego organizmu, ograniczając go specyficznymi enzymami restrykcyjnymi. Następnie przy użyciu tego samego enzymu restrykcyjnego należy otworzyć plazmidy (wektory), aby wstawić fragment genu. Następnie rekombinowany plazmid transformuje się do bakterii gospodarza przy użyciu różnych metod, takich jak elektroporacja. Niektóre z rekombinowanych plazmidów wchodzą do komórek bakteryjnych gospodarza. Za pomocą antybiotyku transformowane bakterie można selekcjonować, izolować i hodować w świeżej pożywce. Zatem ta technika pomaga uzyskać miliony klonów genów.
Amplifikacja genu jest procesem, w którym wykorzystuje się kopie określonego genu in vitro metoda o nazwie PCR. Z drugiej strony klonowanie genów jest procesem polegającym na tworzeniu kopii określonego genu in vivo metoda poprzez konstruowanie wektorów rekombinowanych i namnażanie ich w żywym organizmie. Jest to więc kluczowa różnica między amplifikacją genu a klonowaniem genu. Co więcej, amplifikacja genów zajmuje tylko kilka godzin, a klonowanie genów zajmuje kilka dni. Dlatego też możemy to uznać za różnicę między amplifikacją genu a klonowaniem genu. Co więcej, proces amplifikacji genu pokazuje mniej błędów, podczas gdy proces klonowania genów pokazuje więcej błędów.
Poniższa infografika podsumowuje różnicę między amplifikacją genu a klonowaniem genu.
Amplifikacja genu to proces tworzenia kopii pożądanego genu przy użyciu reakcji łańcuchowej polimerazy w warunkach in vitro, podczas gdy klonowanie genu jest procesem tworzenia kopii interesującego genu przy użyciu rekombinowanej cząsteczki DNA i żywego organizmu / bakterii gospodarza. Jest to zatem podstawowa różnica między amplifikacją genu a klonowaniem genu.
1. „Klonowanie molekularne”. Wikipedia, Wikimedia Foundation, 2 sierpnia 2019, dostępna tutaj.
2. „Amplifikacja genów”. Wzmocnienie genów - przegląd | Tematy ScienceDirect, dostępne tutaj.
1. „PCR” Autor: Madprime - Praca własna (CC BY-SA 3.0) przez Commons Wikimedia
2. „Steps of Molecular Cloning” autor: Alexpicardal97 - Praca własna (CC BY-SA 4.0) przez Commons Wikimedia