Różnica między chromatografią powinowactwa i chromatografii jonowymiennej
Share
The kluczowa różnica między powinowactwem i chromatografią jonowymienną jest to możemy użyć chromatografii powinowactwa do oddzielenia naładowanych lub nienaładowanych składników w mieszaninie, natomiast możemy użyć chromatografii jonowymiennej do oddzielenia naładowanych składników w mieszaninie.
Chromatografia to technika, której możemy użyć do rozdzielenia pożądanych składników w mieszaninie. Istnieją różne typy, takie jak chromatografia cieczowa, chromatografia gazowa itp. Chromatografia powinowactwa i chromatografia jonowymienna to dwie podkategorie chromatografii cieczowej. Ponadto w tych technikach są dwie fazy. Mianowicie są to faza stacjonarna i faza ruchoma. Celem tych technik jest rozdzielenie składników, w zależności od wiązania składników, w fazie ruchomej na powierzchni fazy stacjonarnej.
ZAWARTOŚĆ
1. Przegląd i kluczowa różnica
2. Co to jest chromatografia powinowactwa
3. Co to jest chromatografia jonowymienna
4. Porównanie obok siebie - chromatografia powinowactwa vs jonowymienna w formie tabelarycznej
5. Podsumowanie
Co to jest chromatografia powinowactwa?
Chromatografia powinowactwa jest techniką biochemiczną, którą stosujemy do rozdzielania składników w mieszaninie w zależności od interakcji między tymi składnikami.
Interakcje, których używamy w tym przypadku, obejmują:
- Interakcje antygen-przeciwciało
- Interakcje enzym-substrat
- Interakcje receptor-ligand
- Oddziaływania białko-kwas nukleinowy
W tej technice wykorzystujemy właściwości molekularne cząsteczek do tej techniki rozdzielania. W tym przypadku pozwalamy pożądanemu związkowi oddziaływać z fazą stacjonarną poprzez wiązanie wodorowe, oddziaływanie jonowe, mostki disiarczkowe, oddziaływanie hydrofobowe itp. Cząsteczki, które nie wchodzą w interakcje z fazą stacjonarną, eluują najpierw. W ten sposób możemy oddzielić go od mieszaniny. Pożądany związek pozostanie przyłączony do fazy stacjonarnej. Dlatego możemy go odłączyć za pomocą rozpuszczalnika eluującego i zmusić do elucji, aby go również rozdzielić.
Rysunek 01: Kolumna chromatograficzna
Chromatografia powinowactwa jest użyteczna w oczyszczaniu i zatężaniu substancji z mieszaniny przy użyciu roztworu buforowego. Jest także pomocny w redukcji niepożądanych substancji w mieszaninie. Rozważając aparat, którego używamy do tego procesu, powinniśmy użyć kolumny wypełnionej naszą fazą stacjonarną. Następnie powinniśmy załadować fazę ruchomą, która zawiera biomolekuły, które zamierzamy rozdzielić. Następnie pozwól im związać się z fazą stacjonarną. Następnie, stosując bufor do płukania, możemy oddzielić niedocelowe biomolekuły, ale docelowe cząsteczki powinny mieć wysokie powinowactwo do fazy stacjonarnej, aby odnieść sukces w procesie rozdziału.
Co to jest chromatografia jonowymienna?
Chromatografia jonowa jest formą chromatografii cieczowej, w której możemy analizować substancje jonowe. Często używamy go do analizy anionów i kationów nieorganicznych (tj. Anionów chlorkowych i azotanowych oraz kationów potasowych i sodowych). Chociaż jest to mniej powszechne, możemy również analizować jony organiczne. Ponadto możemy zastosować tę technikę do oczyszczania białek, ponieważ białka są cząsteczkami naładowanymi o określonych wartościach pH. Używamy tutaj stałej fazy stacjonarnej, do której mogą przyczepić się naładowane cząstki. Na przykład, możemy zastosować żywiczne kopolimery polistyren-diwinylobenzen jako stały nośnik.
Rycina 02: Fazy chromatografii jonowymiennej
Aby to wyjaśnić dalej, faza stacjonarna ma utrwalone jony, takie jak aniony siarczanowe lub kationy czwartorzędowych amin. Każdy z nich powinien kojarzyć się z przeciwjonem (jonem o przeciwnym ładunku), jeśli mamy zachować neutralność tego układu. W tym przypadku, jeśli przeciwjonem jest kation, to nazywamy system żywicą kationowymienną. Ale jeśli przeciwjonem jest anion, układ jest żywicą anionowymienną.
Proces wymiany jonowej składa się z pięciu głównych faz;
- Etap początkowy
- Adsorpcja celu
- Rozpoczęcie elucji
- Koniec elucji
- Regeneracja
Jaka jest różnica między chromatografią powinowactwa a chromatografią jonowymienną?
Chromatografia powinowactwa jest techniką biochemiczną, którą stosujemy do rozdzielania składników w mieszaninie w zależności od interakcji między tymi składnikami, podczas gdy chromatografia jonowa jest formą chromatografii cieczowej, w której możemy analizować substancje jonowe. Dlatego główna różnica między chromatografią powinowactwa a chromatografią jonowymienną polega na tym, że chromatografii jonowymiennej możemy używać tylko do oddzielania substancji jonowych, podczas gdy chromatografia powinowactwa jest w stanie oddzielić zarówno cząstki naładowane, jak i nienaładowane. Rozważając zasadę działania, różnica między chromatografią powinowactwa a chromatografią jonowymienną polega na tym, że chromatografia powinowactwa przebiega z powodu faktu, że cząsteczki docelowe mają wysokie powinowactwo do fazy stacjonarnej. Jednak w przypadku chromatografii jonowymiennej cząsteczki docelowe mają ładunek przeciwny do ładunku na powierzchni fazy stacjonarnej.
Poniższa infografika przedstawia różnicę między chromatografią powinowactwa a chromatografią jonowymienną jako porównanie obok siebie.
Podsumowanie - chromatografia powinowactwa vs jonowymienna
Podsumowując, chromatografia powinowactwa i jonowymienna to dwie formy technik chromatografii cieczowej. Kluczową różnicą między chromatografią powinowactwa a chromatografią jonowymienną jest to, że możemy zastosować chromatografię powinowactwa do oddzielenia naładowanych lub nienaładowanych składników w mieszaninie, natomiast możemy zastosować chromatografię jonowymienną do oddzielenia naładowanych składników w mieszaninie.
Odniesienie:
1. „Chromatografia powinowactwa”. Wikipedia, Wikimedia Foundation, 5 października 2018 r. Dostępne tutaj
2. Libretexts. „Chromatografia jonowymienna”. Chemia LibreTexts, Libretexts, 29 grudnia 2016. Dostępne tutaj
Zdjęcie dzięki uprzejmości:
1. „Żywica niklowa” Autor: Pdcook - Praca własna (CC BY-SA 3.0) przez Commons Wikimedia
2. „Iex” autor: Daliak (domena publiczna) za pośrednictwem Commons Wikimedia
