DPBS vs PBS
PBS lub sól fizjologiczna buforowana fosforanem i sól fizjologiczna buforowana fosforanem Dulbecco (DPBS), są buforowanymi solankami stosowanymi w badaniach biologicznych. PBS i DPBS są wykorzystywane w badaniach z udziałem komórek. Stężenie jonów i osmolarność roztworu jest izotoniczna, to znaczy jest zgodna z ludzkim ciałem. Bufor ułatwia zapewnienie i utrzymanie stabilnego pH 7,2-7,6.
Nie ma znaczącej różnicy między PBS a DPBS. Oba zawierają fosforan sodu, chlorek sodu oraz, w razie potrzeby, fosforan potasu i chlorek potasu. Inne preparaty, takie jak DPBS, mogą, ale nie muszą, zawierać wapń i magnez. PBS i DPBS mają wiele zastosowań, ponieważ nie są szkodliwe dla komórek. Zarówno PBS, jak i DPBS można stosować do płukania instrumentów lub pojemników zanieczyszczonych komórkami. Oba mogą być również stosowane w rozcieńczających substancjach. Cząsteczki wody w rozcieńczalnikach, takich jak białko, zostają zatrzymane i wysuszone. Woda, która łączy się z substancją, powstrzymuje substancję przed zmianami konformacyjnymi, takimi jak denaturacja. Roztwory wapnia i magnezu mogą ograniczać aktywność trypsyny. W elipsometrii adsorpcję białka można zmierzyć, przyjmując podstawowe spektrum za pomocą PBS.
Sól fizjologiczną buforowaną fosforanem z dodatkami, takimi jak EDTA, można stosować do oddzielania wiązanych komórek. Strącanie powstaje, gdy cynk, metal dwuwartościowy, jest dodawany do PBS, dlatego nie można go dodawać do niesparowanych komórek. W takiej sytuacji bufor cynku jest używany zamiast cynku.
Sól buforowana fosforanem i sól fizjologiczna buforowana fosforanem Dulbecco są przygotowywane na wiele sposobów. Jednym ze sposobów przygotowania jest rozpuszczenie 800 g. chlorek sodu, 20 g. chlorek potasu, 2 cząsteczki wody, 24 g. fosforan potasu i 144 g. fosforan sodu w 8 l wody destylowanej. Rezultatem będzie 10 litrów 10x PBS. Zmierz pH PBS bezpośrednio za pomocą miernika pH podczas przygotowywania roztworów buforowanych. Wartość pH roztworu można regulować za pomocą wodorotlenku sodu lub kwasu solnego. Sól fizjologiczną buforowaną fosforanem jako rozcieńczalnik przygotowuje się przy końcowym stężeniu 10 mM fosforanu, 137 mM chlorku sodu, 2,7 mM chlorku potasu i pH 7,4. Fritsch, Sambrook i Maniatis na swój sposób przygotowują roztwory buforowe w książce zatytułowanej „Klonowanie molekularne”. Odpowiednio, w przypadku litra 1x PBS rozpocznij przygotowanie od 800 ml. destylowanej wody. Obejmuje 8 g. chlorku sodu oraz 0,2 g. chlorku potasu. 1,44 g. następnie dodaje się fosforan sodu, a następnie 0,24 g. fosforanu potasu. Wstawić kwas solny, aby doprowadzić pH do 7,4. Aby wymyślić 1 litr PBS, dodaj więcej wody destylowanej aż do wyrównania do 1 litra. Wylej powstały roztwór do podwielokrotności i użyj autoklawu do sterylizacji roztworu. Ustaw autoklaw na 121 ° C i autoklawuj go przez 20 minut w cyklu płynnym. Następnie przechowuj roztwór w temperaturze pokojowej.
Chociaż sól fizjologiczna buforowana fosforanem i sól fizjologiczna buforowana fosforanem Dulbecco są przygotowywane na wiele sposobów, zawartość jest nadal taka sama. Dlatego bez względu na to, jak jest przygotowywany, wyniki i zastosowania są nadal takie same.
Streszczenie:
1.PBS lub sól fizjologiczna buforowana fosforanem i sól fizjologiczna buforowana fosforanem Dulbecco (DPBS), są solankami buforowanymi stosowanymi w badaniach biologicznych.
2. Stężenie jonów i osmolarność roztworu jest izotoniczna, to znaczy jest zgodna z ludzkim ciałem. Bufor ułatwia zapewnienie i utrzymanie stabilnego pH 7,2-7,6.
3. Nie ma znaczącej różnicy między PBS a DPBS. Oba zawierają fosforan sodu, chlorek sodu oraz, w razie potrzeby, fosforan potasu i chlorek potasu. Inne preparaty, takie jak DPBS, mogą, ale nie muszą, zawierać wapń i magnez.
4. Oba PBS i DPBS mogą być używane do płukania instrumentów lub pojemników zanieczyszczonych komórkami. Oba mogą być również stosowane w rozcieńczających substancjach. Cząsteczki wody w rozcieńczalnikach, takich jak białko, zostają zatrzymane i wysuszone. Woda, która łączy się z substancją, powstrzymuje substancję przed zmianami konformacyjnymi, takimi jak denaturacja. Roztwory wapnia i magnezu mogą ograniczać aktywność trypsyny. W elipsometrii adsorpcję białka można zmierzyć, przyjmując podstawowe spektrum za pomocą PBS.
5. Sól buforowana fosforanem z dodatkami, takimi jak EDTA, może być stosowana do oddzielania wiązanych komórek. Strącanie powstaje, gdy cynk, metal dwuwartościowy, jest dodawany do PBS, dlatego nie można go dodawać do niesparowanych komórek. W takiej sytuacji bufor cynku jest używany zamiast cynku.
6.PBS i DPBS są przygotowywane na wiele sposobów. Chociaż sól fizjologiczna buforowana fosforanem i sól fizjologiczna buforowana fosforanem Dulbecco są przygotowywane na wiele sposobów, zawartość jest nadal taka sama. Dlatego bez względu na to, jak jest przygotowywany, wyniki i zastosowania są nadal takie same.